Skip to content

aneta bodziony nowy sącz

4 miesiące ago

76 words

Komórki U937PR9 wyrażają znacząco wyższe indukowane poziomy PML / RAR. niż endogenny RAR ., podobny do obserwowanego w świeżych blastach APL (29, 40). Indukcja ekspresji PML / RAR. przez ekspozycję komórek na ZnSO4 pod nieobecność ATRA zniesiono endogenną ekspresję C / EBP. (Rysunek 3, aib). Badania reakcji czasowej ATRA ujawniły, że indukcja PML / RAR. białko zwiększało akumulację C / EBP. mRNA (30-krotnie w 48 godzinie) (Figura 3a). Natomiast bez indukcji PML / RAR. białko, tylko niewielki wzrost (<2-krotnie) w C / EBP. Obserwowano ekspresję mRNA (Figura 3a). Badania reakcji na dawkę ATRA z komórkami U937PR9 wykazały 25-krotną indukcję C / EBP. w 10. 8 M ATRA w obecności PML / RAR ., w porównaniu z maksymalnie 2- do 3-krotną indukcją bez PML / RAR. (Figura 3b). PLZF / RAR. wykazano, że białko fuzyjne powoduje morfologicznie nierozróżnialny APL, ale komórki te nie różnicują się w obecności ATRA (41). Indukcja PLZF / RAR. ekspresja w komórkach U937B412 za pomocą ZnSO4 (100. M) nie zwiększona C / EBP. ekspresja w odpowiedzi na ATRA, czy tłumiona ekspresja C / EBP. przy braku retinoidów (Figura 3c). Poziom C / EBP. Ekspresja mRNA obserwowana w komórkach U937B412 była podobna do obserwowanej w pustych wektorach transfekowanych (U937-pMT) lub nietransfekowanych komórkach U937 (Figura 3 i dane nie pokazane). Te wyniki sugerują, że C / EBP. może być ważnym genem docelowym PML / RAR. w obecności RZS. Rysunek 3Carowany wzrost C / EBP. ekspresja mRNA przez ektopową ekspresję PML / RARa, ale nie PLZF / RARa, w komórkach U937. Komórki U937PR9 lub U937B412, stabilnie transfekowane PML / RAR indukowalnym cynkiem. lub PLZF / RAR. wektory ekspresyjne, odpowiednio, hodowano albo z (+) albo bez (.) 100. M ZnSO4 z lub bez, ATRA i analizowano pod kątem indukcji C / EBP. ekspresja mRNA. (a) Czas reakcji ATRA (10. 8 M) w komórkach U937PR9. Analizę Northern blot przeprowadzono przy użyciu 20 .g całkowitego RNA z komórek U937PR9 eksponowanych przez ATRA na różne okresy czasu. (b) Reakcja na dawkę przez ATRA w komórkach U937PR9. Analizę Northern blot przeprowadzono przy użyciu 20 .g całkowitego RNA komórek U937PR9 eksponowanych na różne stężenia ATRA przez 24 godziny. (c) Odpowiedź na dawkę przez ATRA w komórkach U937B412. Analizę Northern blot przeprowadzono przy użyciu 30 .g całkowitego RNA komórek U937B412 eksponowanych na różne stężenia ATRA przez 3 dni. Górne panele pokazują 1,2-kb C / EBP. transkrypt po hybrydyzacji z pełnej długości C / EBPa, a dolne panele pokazują hybrydyzacje z sondą p-aktyną lub GAPDH w celu potwierdzenia równoważnego obciążenia RNA. C / EBP. ekspresja w liniach komórkowych APL odpornych na retinoidy. Rola C / EBP. obserwowano ekspresję w liniach komórkowych opornych na ATRA. Komórki UF-1, linia komórkowa APL ustalona od pacjenta opornego na ATRA, są również stosunkowo oporne na ATRA in vitro (28). Komórki te hodowano przez 3 dni w różnych stężeniach ATRA i badano pod kątem markera różnicowania CD11b i ekspresji C / EBPa. mRNA. Poziom C / EBP. Ekspresja i różnicowanie mRNA nie pojawiły się, dopóki do hodowli nie dodano ATRA ^ ATRA (figura 4a). Również brak indukcji C / EBP. mRNA wystąpił, gdy całkowicie oporne na RA subklony komórek NB4, MR6 i R4 (31, 42) były hodowane z ATRA (10. 6 M) przez 3 dni (Figura 4b). Te podlininy komórek NB4 wyrażają PML / RAR. białko, ale znacznie zmniejszyło wiązanie ligandu (31). Sekwencjonowanie PML / RAR. z R4 wykazała mutację punktową w domenie wiążącej ligand genu fuzyjnego (42). Nasze dane sugerują, że zdolność różnicowania komórek APL przez RA jest ściśle związana z zależną od RA indukcją C / EBP. wyrażenie. Rysunek 4C / EBP. ekspresja w liniach komórkowych APL odpornych na retinoidy [przypisy: barszcz zwyczajny a sosnowskiego różnice, mielopatia szyjna objawy, acetylowany adypinian diskrobiowy ]

0 thoughts on “aneta bodziony nowy sącz”