Skip to content

centrum damiana wałbrzyska telefon

2 miesiące ago

577 words

Naturalnie występujące komórki UF-1 oporne na retinoid odporne na APL hodowano ze wzrastającymi stężeniami ATRA przez 3 dni. Northern blot całkowitego RNA (20 .g) z komórek UF-1 hybrydyzowano z C / EBP. sonda cDNA (u góry) i kontrola p-aktyny (u dołu). Różnicowanie było dostępne przez pomiar ekspresji CD11b przy użyciu FACS .. (b) Podliniowe oporne na retinoidy NB4: MR6 i R4. NB4 i oporne na retinoidy podlininy komórek NB4 hodowano albo w nieobecności albo w obecności ATRA (10. 6 M) i zbierano w dniach i 3. Analizę Northern blot przeprowadzono stosując 5. G całkowitego RNA. Górny panel pokazuje C / EBP. mRNA (1,2 kb), a dolny panel pokazuje prążki 28S w celu potwierdzenia równoważnego obciążenia RNA. Efekt C / EBP. nadekspresja w różnicowaniu granulocytów komórek U937. Linia komórkowa białaczki mielomonocytowej U937 może różnicować się w kierunku linii monocytowych lub granulocytarnych. Aby dalej ocenić, czy indukcja C / EBP. ekspresja jest krytycznym krokiem w procesie zaangażowania w linię granulocytową, ludzką C / EBP. Wektor ekspresyjny cDNA (pMT p3) pod kontrolą indukowalnego cynkiem promotora metalotioneiny stabilnie transfekowano do komórek U937 (U937-pMT a 32). Gdy ZnSO4 (100. M) dodano do pożywki, C / EBP. ekspresja białka wzrosła dramatycznie w komórkach U937-pMT p 32 (Figura 5a). Komórki U937-pMTA 32 hodowano w sposób ciągły w obecności G418 (900 .g / ml) z lub bez ZnSO4 (100 .M) przez okres do 22 dni i komórki U937, które były trwale transfekowane wektorem kontrolnym pMT ( U937-pMT), podobnie hodowano. Zmiany w morfologii komórki badano kolejno (ryc. 5b). Komórki U937-pMTA 32 hodowane bez komórek ZnSO4 i U937-pMT hodowanych z lub bez ZnSO4 miały morfologię, która była nie do odróżnienia od nietransfekowanych komórek U937 (Figura 5b). Komórki te pojawiają się jako mieloidalne blaszki białaczkowe o jednorodnie dużych jądrach o wysokich proporcjach jądrowych / cytoplazmatycznych, drobnej chromatynie jądrowej, wielu jąderkach i skąpej niebieskiej cytoplazmie. W przeciwieństwie do tego, gdy hoduje się je w obecności ZnSO4, komórki U937-pMT332 zaczynają wykazywać cechy morfologiczne różnicowania już od 4 do 5 dni. Te morfologiczne zmiany różnicowania postępowały aż niektóre komórki miały wygląd skrajnie zróżnicowanych neutrofili. Zmiany te można scharakteryzować przez wzrost cytoplazmy, zmniejszenie wielkości jądra i bardziej skondensowaną chromatynę jądrową, a także pojawienie się form pasmowych i polimorfojądrowych. Ten poziom zróżnicowania osiągnął najwyższą wartość w dniach 10. 12 hodowli (Figura 5b). Rysunek 5 Wpływ C / EBP. nadekspresja w komórkach U937. (a) Western blot komórek U937 trwale transfekowanych pustym wektorem lub indukowanym cynkiem C / EBP. wektor ekspresji. Komórki COS-1 transfekowane C / EBP. wektor ekspresyjny zastosowano jako kontrolę pozytywną. (b) C / EBP. nadekspresja indukuje różnicowanie granulocytowe komórek U937. Pokazano reprezentatywne zmiany morfologiczne widoczne po 10 dniach inkubacji cynku w preparatach Wrighta-Giemsy. Barwionej cytospiny w mikroskopie świetlnym. Strzałki reprezentują różnicowanie granulocytów. (c) Ekspresja CD11b wzrasta przy indukcji cynku (24 godziny) C / EBP .. (d) Ekspresja CD66b jest silnie podwyższona w dniach 4 i 10 inkubacji cynku w komórkach U937-pMT 32. (e) Wtórne transkrypty białka granularnego indukowane są za pomocą C / EBP. nadekspresja w komórkach U937. Pokazano reprezentatywne bloty Southern produktów RT-PCR dla ludzkich genów laktoferyny neutrofilowej i kolagenazy w komórkach U937 inkubowanych z ATRA (10. 6 M przez 1, 4, 7 i 10 dni) lub U937-pMT i U937-pMT. 32 komórki hodowano z lub bez ZnSO4 (100. M). Southern blot produktu GAPDH RT-PCR pokazano jako kontrolę. (f) Indukcja ludzkiego mRNA laktoferyny neutrofili przez C / EBP. nadekspresja za pomocą analizy Northern blot
[hasła pokrewne: żółty stolec, storczyki allegro, slimtox allegro ]

0 thoughts on “centrum damiana wałbrzyska telefon”

  1. [..] odnosnik do informacji w naukowej publikacji odnosnie: dobry psychoterapeuta warszawa[…]

  2. [..] Blog oznaczyl uzycie nastepujacego fragmentu kolonoskopia w znieczuleniu ogólnym[…]