Skip to content

Inaktywacja mutacji w genie 1-hydroksylazy D3 1-hydroksywitaminy u pacjentów z krzywicą pseudowitaminową D-Deficiency ad 6

3 miesiące ago

539 words

Pokazano wartości odpowiadające średniej (. SE) dla trzech niezależnych eksperymentów. Aktywności 1.-hydroksylazy typu dzikiego i zmutowanych enzymów u czterech pacjentów oceniano przez zbadanie indukowanej przez ligand funkcji transaktywacji receptora witaminy D. Receptor witaminy D był aktywowany tylko wtedy, gdy 25-hydroksywitamina D3 dodana do pożywki hodowlanej została przekształcona w aktywny ligand, prawdopodobnie 1., 25-dihydroksywitaminę D3 (Figura 4A). Ekspresja 1.-hydroksylazy typu dzikiego aktywowała gen reporterowy (Figura 4B, ścieżki 3 i 4), tak jak w 1.-hydroksylazie myszy 16 (linia 5). Przeciwnie, żaden z mutantów (Figura 4B, ścieżki 8, 9, 10 i 11) nie zwiększał aktywności genu reporterowego. Analiza translacji in vitro wykazała, że plazmidy typu dzikiego i zmutowane ulegały translacji z podobną wydajnością przy wielkości 55 kD (dane nie pokazane).
Aktywność 1.-hydroksylazy tych mutantów badano w celu określenia zdolności enzymu do katalizowania konwersji 25-hydroksywitaminy D3 do 1., 25-dihydroksywitaminy D3. Gdy dodano trytowaną 25-hydroksywitaminę D3 do komórek transfekowanych plazmidem ekspresyjnym 1.-hydroksylazy typu dzikiego, wykryto metabolit (Figura 4C, dolne panele) w czasie retencji identycznym z autentycznym 1., 25-dihydroksywitaminą D3 (Figura 4C, górne panele). Jednakże żaden z mutantów nie przekształcił 25-hydroksywitaminy D3 w 1., 25-dihydroksywitaminę D3 (Figura 4D). Wyniki te wskazują, że produkty białkowe czterech mutacji występujących u pacjentów z krzywicą pseudowitaminy D nie miały aktywności 1.-hydroksylazy.
Dyskusja
Odpowiedzialne geny i ich mutacje zostały zidentyfikowane dla dwóch rodzajów dziedzicznych krzywic oprócz krętków pseudowitaminy D z deficytem.5-8 Wyizolowaliśmy ludzki cDNA kodujący hydroksylazę 25-hydroksywitaminy D3 1. i zidentyfikowaliśmy różne homozygotyczne mutacje missense w tym genie u czterech pacjentów z krzywicą pseudowitaminy D z niedoborem. Każda z czterech mutacji zniosła aktywność 1.-hydroksylazy. Bezobjawowi rodzice i rodzeństwo byli heterozygotyczni pod względem mutacji, demonstrując autosomalne recesywne dziedziczenie tej choroby. Wnioskujemy, że krzywica pseudowitaminy D jest spowodowana przez dezaktywację mutacji w genie 1.-hydroksylazy.
Nie znaleźliśmy żadnej korelacji między fenotypem a genotypem; wszystkie cztery mutacje zniosły aktywność 1.-hydroksylazy, a cechy kliniczne u wszystkich czterech pacjentów były podobne. Heterogenność kliniczną odnotowano w przypadku krzywicy pseudowitaminy D, 2,34 i mogą występować inne mutacje, które tylko częściowo zmniejszają aktywność enzymu, jak ma to miejsce w przypadku innych enzymów P450.35,36 W badaniu wstępnym u pacjenta z pseudowitaminą Krzywicy z niedoborem D o łagodnych cechach klinicznych, nie wykryliśmy mutacji w regionie kodującym (dane niepublikowane), co sugeruje, że ekspresja genu może być osłabiona przez mutację w regionie promotora. Alternatywnie, może występować różnorodność genetyczna w krzywicy pseudowitaminy D z niedoborem, a dalsza analiza może ujawnić mutacje w innym genie. Znaleźliśmy tylko homozygotyczne mutacje u czterech pacjentów, co jest zgodne z odkryciem, że w rzadkich autosomalnych chorobach recesywnych mutacje homozygotyczne są częste, a heterozygoty złożone są niezbyt częste.
Zmutowana reszta (Pro382Ser) u jednego z naszych pacjentów była zlokalizowana w konserwatywnym regionie spośród różnych enzymów P450, które, jak się zakłada, są wymagane do wiązania substratu, 38,39 i inna zmutowana reszta (Gly125Glu) była zlokalizowana w regionie odpowiadającym miejsce rozpoznawania substratu w rodzinie P450 (CYP2) .40 Mutacje te prawdopodobnie znoszą aktywność 1.-hydroksylazy poprzez zmniejszenie jej powinowactwa do 25-hydroksywitaminy D3
[przypisy: polyporus, disulfiram, dronedaron ]
[patrz też: złoto koloidalne, żółty stolec, szkoła muzyczna inowrocław ]

0 thoughts on “Inaktywacja mutacji w genie 1-hydroksylazy D3 1-hydroksywitaminy u pacjentów z krzywicą pseudowitaminową D-Deficiency ad 6”

  1. [..] odnosnik do informacji w naukowej publikacji odnosnie: alkohol a zdrowie[…]

  2. Oprócz tego że masz problemy z tarczyca to prawdopodobnie cierpisz na tężyczkę utajona