Jako kontrolę stosowano surowicę przed immunizacją (mock). Przeciwciała, przyłączone do kuleczek białka A-agarozy, inkubowano z homogenatami białka przytarczyc. Perełki wytrącono i przyłączony RNA eluowano i ekstrahowano w celu analizy. Przeprowadzono analizę Northern blot dla mRNA PTH. Eluanty z peletek poddano immunoprecypitacji zarówno z przeciwciałem IC jak i przed immunizującym surowicą wiążącym RNA, jak widać na Figurze 4. Jednak mRNA PTH był znacznie silniej wytrącany przez przeciwciało IC niż przez pozorowane przeciwciało (Figura 4). Rehybrydyzacja błony dla histonu H4 ...
U obu pacjentów PBMC analizowano pod kątem specyficzności specyficznego dla allelu PCR (pacjent 1, ścieżki 6 i 7, pacjent 2, ścieżka 6). Analiza sekwencji pasma monoklonalnego w próbkach chłoniaka MALT o niskim stopniu złośliwości, uzyskanych w 1990 i 1992 roku, wykazała dwa główne klony chłoniaka o 97 bp i 100 pz. Ponieważ dwa różniły się jedynie o 3 bp, nie można było ich wyraźnie rozróżnić na elektroforezie żelowej. Obie sekwencje CDR3 tych klonów zostały użyte do specyficznego dla allelu PCR, a oba klony były obecne w początkowej próbce (1981), jak również w próbkach biopsy...
Zarówno plazmidy pMT p3 i pMT, jak również plazmidy pEGFP, zawierały gen oporności na neomycynę jako marker selekcyjny. Selekcję stabilnie transfekowanych komórek rozpoczęto 48 godzin po elektroporacji z G418 przy 900 .g / ml. Ponadto, 10 dni po rozpoczęciu selekcji G418, jasne, fluorescencyjne komórki o fluorescencji. Sortowano według FACS. i dalej hoduje się do ekspansji w ciągłej selekcji G418. Wielokrotne hodowle poliklonalne (> 98% GFP-dodatnich) przeszukiwano pod kątem C / EBP-cynku (o stężeniu 100 .M). nadekspresja metodą analizy Western blot. Analizy Western i Northern blot. C ...
