Skip to content

Osteoklasty wykazujące ekspresję genu nukleokapsydowego wirusa odles wykazują fenotyp pagetyczny

4 miesiące ago

610 words

Osteoklasty (OCL) w chorobie Pageta są znacznie zwiększone pod względem liczby i wielkości, mają zwiększoną liczbę jąder na wielojądrzastą komórkę i wykazują zwiększoną zdolność resorpcji i zwiększoną wrażliwość na 1,25- (OH) 2D3, aktywną postać witaminy D Komórki te zawierają także wtrącenia jądrowe, przypominające te obserwowane w komórkach zakażonych paramyksowirusem, które reagują krzyżowo z przeciwciałami przeciwko antygenowi nukleokapsydu wirusa wirusa zapalenia mięśnia dęby (MVNP). Aby wyjaśnić rolę MV w nieprawidłowym fenotypie choroby Pageta, transdukowaliśmy normalne prekursory OCL wektorami retrowirusowymi wyrażającymi MVNP i geny MV matrix (MVM). Transdukowane komórki następnie hodowano z 1,25 (OH) 2D3 przez 14 lub 21 dni w celu zaindukowania tworzenia komórek wielojądrowych podobnych do OCL. Transdukowane komórki MVNP tworzyły zwiększoną liczbę komórek wielojądrowych, które zawierały dużo więcej jąder komórkowych i miały zwiększoną zdolność resorpcji w porównaniu z komórkami wielojądrzastymi pochodzącymi z transdukowanych pustych wektorów (transdukowanych EV) i transdukowanych MVM lub normalnych komórek szpiku kostnego. Ponadto komórki transdukowane MVNP wykazywały zwiększoną wrażliwość na 1,25- (OH) 2D3 i tworzyły OCL w stężeniach 1,25- (OH) 2D3, które były o log niższe niż wymagane dla normalnego, transdukowanego EV lub MVM -przekroczone komórki. Wyniki te pokazują, że ekspresja genu MVNP w normalnych prekursorach OCL stymuluje tworzenie OCL i indukuje OCL, które wykazują fenotyp podobny do fenotypowych paglicowych OCL. Wyniki te potwierdzają potencjalną rolę patofizjologiczną zakażenia MV w nieprawidłowej aktywności OCL i morfologii, które są charakterystyczne dla OCL typu Pag. Wprowadzenie Choroba kości Pageta jest przewlekłym ogniskowym zaburzeniem szkieletowym, dotykającym 1. 2% populacji powyżej 45 roku życia, w której pierwotna nieprawidłowość komórkowa występuje w osteoklastach (OCL) (1). OCLs od pacjentów Pageta wyrażają unikalny fenotyp. Są one znacznie zwiększone pod względem liczby i wielkości i mają zwiększoną liczbę jąder w komórkach wielojądrowych, wykazują zwiększoną zdolność resorpcji i są nadwrażliwe na 1,25- (OH) 2D3, aktywną postać witaminy D (2, 3). Badania immunocytochemiczne wykazały, że Pagetyczne OCL zawierają wtrącenia jądrowe podobne do paramyksowirusów, które reagują krzyżowo z przeciwciałami przeciwko wirusowi odry (MV), wirusowi syncytialnego układu oddechowego i antygenem nukleokapsydowym wirusa psiego dystrofia (4. 7). Badania hybrydyzacji in situ wykazały ekspresję transkryptów MVNP (MVNP) MV w OCLs od pacjentów z chorobą Pageta (8, 9). Ponadto prekursory OCL i krążące komórki krwi obwodowej od pacjentów Pageta wyrażają transkrypty MVNP (10). Jednak rola infekcji MV w nieprawidłowym fenotypie OCL w chorobie Pageta jest nieznana. Transdukowaliśmy geny MV do normalnych prekursorów OCL, aby określić ich rolę w nieprawidłowej aktywności OCL w chorobie Pageta. W szczególności skonstruowaliśmy wektory retrowirusowe wyrażające geny MVNP i MV matrix (MVM) i transdukowaliśmy te konstrukty do normalnych komórek szpiku kostnego, aby określić, czy ekspresja konkretnego genu MV indukowała fenotyp w OCLs, który był bardzo podobny do fenotypu OCLs od pacjentów Pageta. Wyniki tych badań wykazały, że ekspresja genu MVNP, ale nie genu MVM, w normalnych prekursorach OCL nasiliła tworzenie OCLs, które miały wiele cech charakterystycznych dla paglicowych OCL. Metody Przedmioty i przygotowanie komórek. Instytucjonalna Komisja Rewizyjna Centrum Zdrowia Uniwersytetu w Teksasie w San Antonio zatwierdziła te badania. Komórki szpiku kostnego odsysano z grzbietu biodrowego zdrowych zdrowych dawców w 10 oddzielnych okazjach. Jednojądrzaste komórki szpiku kostnego rozdzielano na gradientach Ficoll (gęstość 1,077 g / ml) przez odwirowanie przy 400 g przez 30 minut, a następnie przemywano 3 razy za pomocą P-MEM, jak opisano wcześniej (11). Konstrukcja wektora retrowirusowego i preparat supernatantu wirusowego
[przypisy: olej rydzowy właściwości, grzybek tybetański allegro, storczyki allegro ]

0 thoughts on “Osteoklasty wykazujące ekspresję genu nukleokapsydowego wirusa odles wykazują fenotyp pagetyczny”