Skip to content

poradnia pedagogiczno psychologiczna zgierz

2 miesiące ago

458 words

Zastosowaliśmy test RT-PCR w celu określenia, które populacje komórkowe w śledzionie ulegają ekspresji w mRNA receptora AT1A. Jak pokazano na Figurze 3, mRNA receptora AT1A można było zamplifikować z RNA otrzymanego z populacji komórek T, komórek B lub makrofagów, które wyizolowano ze śledzion myszy C57BL / 6 typu dzikiego. Zatem receptor AT1A jest zdecydowanie dominującym receptorem angiotensyny II ekspresjonowanym przez komórki odpornościowe w śledzionie. Figura 2 [125I] wiązanie radioliganda angiotensyny II w splenocytach myszy. [125I] Wiązanie radioliganda z angiotensyną II w zawiesinach komórkowych przygotowanych z całych śledzion z Agtr1a + / + (otwarte słupki) i Agtr1a2 /. (wypełnione słupki) myszy. Całkowite wiązanie pokazano po lewej stronie, a wiązanie w obecności losartanu jako antagonisty receptora AT1 pokazano po prawej stronie. Figura 3 Ekspresja mRNA receptora 3AT1A w populacjach komórek wyizolowanych ze śledziony. Ekspresję mRNA receptora AT1A w śledzionie oceniano za pomocą RT-PCR. Całkowity RNA został wyizolowany, a RT-PCR przeprowadzono przy użyciu starterów specyficznych dla receptora AT1A (7). Produkty PCR frakcjonowano pod względem wielkości na żelu agarozowym, który zabarwiono bromkiem etydyny. Produkt PCR o długości 457 bp jest łatwo widoczny w próbkach z izolowanych śledzionowych limfocytów T (linia 2), limfocytów B (linia 3) i makrofagów (linia 4) lub nieseparowanych splenocytów (linia 5) od myszy typu dzikiego. Nie wykryto żadnego produktu w RNA wyizolowanym ze splenocytów myszy z niedoborem receptora AT1A (linia 6). W innych typach komórek, takich jak komórki mięśni gładkich naczyń, angiotensyna II stymuluje wzrost i proliferację komórek (3, 32, 33). Aby zbadać funkcję receptorów angiotensyny ekspresjonowanych przez komórki zapalne, przetestowaliśmy, czy angiotensyna II może indukować proliferację limfocytów śledziony. Po inkubacji ze stężeniami 1. M inhibitora enzymu konwertującego angiotensynę (ACE) w celu blokowania endogennej syntezy angiotensyny II, splenocytów z typu dzikiego i Agtr1a. /. myszy eksponowano na wzrastające stężenia peptydu angiotensyny II. Jak pokazano na Figurze 4, sama angiotensyna II była wystarczająca do spowodowania proliferacji limfocytów śledziony od zwierząt Agtr1a + / +. Wielkość odpowiedzi zależała od dawki, a maksymalny efekt zaobserwowano dla stężeń angiotensyny II równej 1. 3. M. Działania angiotensyny II w celu stymulacji proliferacji komórek typu dzikiego zostały całkowicie zablokowane przez losartan, antagonistę receptora AT1 (dane nie przedstawione). Ponadto, jak pokazano na Figurze 4, splenocyty z myszy z niedoborem receptora AT1A p nie proliferują w odpowiedzi na angiotensynę II, wskazując, że te działania są mediowane przez receptory AT1A. Figura 4Angiotensyna II stymuluje proliferację splenocytów. Stężenie angiotensyny II w zakresie 0,01 – 3 (3 M dodawano do zawiesin pojedynczych komórek splenocytów z typu dzikiego (otwarte słupki) i Agtr1a. /. myszy (wypełnione słupki). Proliferację oceniano 48 godzin później jako inkorporację [3H] tymidyny. * P <0,001 vs. 0. M angiotensyna II; ** P <0,0001 versus 0. M angiotensyna II; P <0,03 względem Agtr1a + / +; P <0,008 względem Agtr1a + / +;

0 thoughts on “poradnia pedagogiczno psychologiczna zgierz”