Skip to content

romadent rodzinny gabinet stomatologiczny

4 miesiące ago

629 words

Jako kontrolę stosowano surowicę przed immunizacją (mock). Przeciwciała, przyłączone do kuleczek białka A-agarozy, inkubowano z homogenatami białka przytarczyc. Perełki wytrącono i przyłączony RNA eluowano i ekstrahowano w celu analizy. Przeprowadzono analizę Northern blot dla mRNA PTH. Eluanty z peletek poddano immunoprecypitacji zarówno z przeciwciałem IC jak i przed immunizującym surowicą wiążącym RNA, jak widać na Figurze 4. Jednak mRNA PTH był znacznie silniej wytrącany przez przeciwciało IC niż przez pozorowane przeciwciało (Figura 4). Rehybrydyzacja błony dla histonu H4 i barwienie membrany bromkiem etydyny wykazało wiązanie tych RNA z obydwoma przeciwciałami, ale nie było różnicy w wiązaniu między przeciwciałami swoistymi i pozorowanymi (Figura 4). Nie da się łatwo wytłumaczyć, dlaczego RNA zostały wytrącone przez oba przeciwciała. Jednak przeciwciało IC wykazało zwiększone wiązanie tylko z mRNA PTH, a nie z rybosomalnymi RNA. Wynik ten sugeruje, że mRNA PTH specyficznie wiąże się z kompleksem dyneinowym w przytarczyce. Wiązanie to może pośredniczyć w połączeniu mRNA PTH z mikrotubulami. Figura 4PTH mRNA poddano immunoprecypitacji z użyciem przeciwciał IC. Ekstrakty przytarczyc inkubowano z przedimmunizacyjną próbą (M) lub przeciwciałami IC i RNA wymywano z peletek i analizowano na obecność mRNA PTH i histonu H4. Czas ekspozycji wynosił dzień dla mRNA PTH i 4 dni dla mRNA histonowego H4. Barwienie bromkiem etidium pokazano na dolnym panelu. Było więcej mRNA PTH w immunoprecypitacie IC niż w pozorowanym przeciwciele. Omówienie Wiązanie się białek cytoplazmatycznych z 3 (3UT mRNA było związane z wieloma właściwościami mRNA, takimi jak jego stabilność, translacja i lokalizacja wewnątrzkomórkowa. W celu zidentyfikowania białek, które wiążą się z p-RNA mRNA PTH, przeprowadzono klonowanie ekspresyjne przy użyciu strategii Northwestern. Klonowanie tego ekspresji zidentyfikowało 3 klony, które wiążą się z mRNA PTH pełnej długości i 3 -UTR, ale nie wiążą sondy pozbawionej 3 -UTR. Jeden z tych klonów zidentyfikowano przez sekwencjonowanie jako LC8. MRNA LC8 i białko ulegały ekspresji w przytarczyce. Wiązanie LC8 z p-MR mRNA pTH potwierdzono przez wiązanie rekombinowanego LC8 z pełnej długości mRNA PTH i transkryptami 3 -UTR przez REMSA. LC8 jest częścią kompleksu dyneinowego komórki, która wiąże się z mikrotubulami (20). Wykazaliśmy, że mRNA PTH pochodzący od szczurzych przytarczyc związanych in vitro ze spolimeryzowanymi mikrotubulami przygotowanymi z mózgów łydek, a do tego związku rywalizował nadmiar LC8. Ponadto endogenny mRNA PTH jest również związany ze spolimeryzowanymi mikrotubulami wytworzonymi z ekstraktu cytosolowego szczurzych przytarczyc. Obecność kompleksu dyneiny w peletce mikrotubuli została potwierdzona metodą Western blot z przeciwciałami przeciw składnikom kompleksu dyneinowego. Aby zademonstrować interakcję mRNA PTH i kompleksu dyneiny w ekstraktach gruczołów przytarczyc, przeprowadziliśmy immunoprecypitację kompleksu dyneinowego przez przeciwciało do IC i zmierzyliśmy obecność mRNA PTH w tym immunoprecypitacie. Immunoprecypitacja przez przeciwciało IC zawierała więcej mRNA PTH niż pozorowana immunoprecypitacja. Sugerując, że mRNA PTH oddziałuje z kompleksem dyneiny in vivo, rRNA nie został immunoprecypitowany preferencyjnie przez przeciwciało IC. Związek mRNA PTH z LC8 i mikrotubulami sugeruje, że komórka przytarczycowa wykorzystuje LC8 do wiązania mRNA PTH i translokacji go wzdłuż mikrotubul do dalszego przetwarzania lub translacji. Wielkość LC8 (8 kDa) nie jest zgodna z rozmiarem białek wiążących RNA PTH (50, 60 i 110 kDa) (10), których wiązanie jest regulowane przez wapń i fosforan i określa stabilność RNA. Interesujące jest to, że wiązanie tych białek zależy również od końca 60 nukleotydów mRNA pTH 3 -UTR, tak jak w przypadku LC8 (10).
[więcej w: philips lumea allegro, leobert allegro, allmedica nowy sącz ]

0 thoughts on “romadent rodzinny gabinet stomatologiczny”

  1. Niedoczynność tarczycy to dość uciążliwa choroba i trzeba brać leki praktycznie cały czas

  2. [..] Oznaczono ponizsze tresci z artykulu oryginalnego: najlepsza dieta pudełkowa[…]

  3. Mi lekarz zalecił zmianę diety i stosowanie dużo antyoksydantów, polecił wyciąg z modrzewia dahurskiego z witaminą c oraz więcej ruchu